ÖZ
Amaç: Bilindiği gibi mikroskobik takip işlemlerinin ilk aşaması fiksasyondur. Işık mikroskobik takip işlemlerinde formaldehit elektron mikroskobik takip işlemlerinde ise gluteraldehit-osmium tetraoksit ikilisi fiksasyon amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada her iki fiksatif kullanımının karaciğer boyutu üzerindeki etkisinin stereolojik bir teknik olan Cavalieri Prensibi ile değerlendirilmesi amaçlandı.
Gereç ve Yöntem: Çalışmada 5 adet erişkin, dişi Sprague Dawley cinsi sıçan kullanıldı. Her denekten alınan karaciğerlerin hacimleri suya daldırma metodu (SDM grubu) ile ölçüldükten sonra alınan karaciğer örnekleri ışık mikroskobik inceleme için %10’luk formaldehit ile fiksasyon işlemine tabi tutuldu (grup 1; n= 10 parça karaciğer). Elektron mikroskobik incelemede ön fiksasyon için %3’lük gluteraldehit ve post fiksasyon için % 1’lik fosfat tamponlu osmium tetraoksit kullanıldı (grup 2; n=10 parça karaciğer). Daha sonra tüm bloklardan elde edilen kalın (5 µm) ve yarı ince (1 µm) seri kesitler kameralı bir ışık mikroskobu yardımıyla fotoğraflandı ve bu fotoğraflar üzerinde Cavalieri metodu(CM) ile hacim ölçümü yapıldı. Takiben elde edilen sonuçlar kıyaslandı ve istatistiksel olarak değerlendirildi.
Bulgular: Çalışmamızın sonuçlarına göre SDM grubu, grup 1 ve grup 2’ ye ait karaciğerlerin ortalama hacimleri sırasıyla 9.178, 9.104 ve 8.522 mm3 olarak hesaplandı. Hem grup 1 ve 2’nin hacim değerleri arasında hem de SDM grubu ile 2. grubun sonuçları arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunmaktaydı (p< 0,05; Independent Samples T Test).
Sonuç: Literatürde özellikle immünohistokimyasal çalışmalarda gluteraldehit- osmium tetraoksit çifti ve formaldehitle fiksasyonun etkinliğinin kıyaslandığı çalışmalar mevcuttur. Fakat günümüze kadar bu fiksatiflerin karaciğer boyutu üzerine etkisi ile ilgili herhangi bir çalışma yapılmamıştır. Bu çalışmada gluteraldehit-osmium tetraoksit kombinasyonu ve formaldehitin karaciğer boyutu üzerinde farklı etkileri olduğu tarafsız bir yöntem olan stereolojik yaklaşımla gösterilmiştir.
0 yorum:
Yorum Gönder